hab noch mal drüber geschlafen...
Kits für Vaterschaftstest sind wahrscheinlich Quatsch - wie gesagt schreib mir mal welche Dir im Kopf schweben, dann können wir es konkret durchchecken, aber soweit ich weiß laufen die alle entweder mit Radioaktivität oder Fluoreszenz und da sind die Folgekosten nicht zu unterschätzen...
Warum baust Du nicht einen Vaterschaftstest nach ???
Du brauchst dafür:
1. richtig gute humane DNA (Deiner Schüler) und hier macht ein Kit Sinn - wenn Ihr zumindestens eine Zentrifuge habt !!!
2. VNTR Marker - da Ihr ja sowieso PCR durchnehmt - warum macht Ihr nicht Eure eigenen Primer ? und bestellt diese und
3. eine TaqPolymerase, Aqua bidest., dNTPs
4. Geräte:
Pipetten - Standardpipettiermengen liegen im Bereich von 0,5 - 100 µl ! Mikro nicht Milli d.h. von etwa einem 40tel Tropfen bis 5 Tropfen - PCR Ansätze größer 50 - 100 µl machen wenig Sinn, da die zulange für die Temperaturwechsel brauchen. 100 µl ist das Maximum der größten PCR Maschinen
PCR Maschine - gibt es ab ca. 2000 €, gebraucht vielleicht noch billiger, man kann aber auch mit 3 Wasserbädern improvisieren (100°C, 55°C und 72°C)und dann die tubes in einen Schwimmer packen und alle 30 sec von einem ins nächste ... genaues "Programm" kann ich liefern ! da sind die Schüler gur beschäftigt bei 30 Zyklen
Elektrophoreseeinheit - da wirst Du kaum drumherumkommen - es gibt aber schon welche, die "plug and play" sind ... Stecker in die Steckdose, fertiggel rein und los
DNA Farbstoff und UV Lampe - DNA Farbstoffe sind meist karzinogen und mutagen,/logisch sie interagieren mit der DNA) es gibt aber welche, die harmlos sind weil sie keine intakten biologischen Mebranen durchdringen können und damit keine lebendigen Zellen schädigen - UV Lampe (Schwarzlicht) sollte sich irgendwo finden oder ???
VNTR Marker sind mein täglich Brot ich habe (nicht übertrieben)für ca. 1000 Primer berechnet und auf Informativität getestet, ich könnte die Sequenzen von nachgewiesen polymorphen VNTR´s liefern, dann könnt Ihr mit einem freeware Program (Generunner - ein excellentes Programm für DNA Analysen) die Primerberechnungen durchführen und die im Internet gegenchecken mit ePCR oder BLast - Primer bestellen (ein Primerpaar kostet ca 12 - 20 €, danach Primer verdünnen etc.
PCR - warum Kits verwenden Taq Polymerase ist viel billiger, enthält fast alles und veranschaulicht außerdem Enzymreaktionen und PCR Ablauf - man kann auch den Effekt von z.B. Magnesium als Kofaktor sehr wirkungsvoll testen, oder den Einfluß von Substanzen, die die DNA Hybridisierung beeinflussen - In einer Standard PCR Reaktion sind nur TaqPolymerase Puffer (kommt mit der Polymerase), Taq Polymerase, Magnesiumchlorid (kommt meist mit der Polymerae) und dNTP´s (extra zu bestellen!) und natürlich DNA und Aquq bidest.
wirklich entscheidend ist die Möglichkeit kleinste Mengen zu pipettieren und das genau! sonst wird das nix so richtig ... ein Satz high end Pipetten kostet 1000 € gibts aber sicher auch schon genauso gut und billiger und ist eine Investition für Jahrzehnte !!! die billigste, die ich auf Anhieb im Internet gefunden hab war die Surepette (Made in China so für ab 50 €) - da braucht man dann noch "tips" also die Spitzen dafür, aber das sind relative Pfennigartikel --- zum Vergleich "meine" Pipetten kosten ca 400 €! das Stück
für die Elektrophorese braucht man im Prinzip Agarose, zwei Platinelektroden und Gleichspannung ! nicht mehr nicht weniger !!! Kämme und Kammer kann man sich selber basteln !!! ist dann aber sicherheitstechnisch fragwürdig - weiß nicht ob da eine Profikammer nicht doch besser wäre ?!
AJH
